Пцр анализ в гинекологии что это такое

ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

Поделиться

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.

Специфичность и применение

ПЦР – метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.

После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

• ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать;
• два праймера, комплементарные концам требуемого фрагмента;
• термостабильная ДНК-полимераза;
• дезоксинуклеотидтрифосфаты (A, G, C, T);
• ионы Mg2+, необходимые для работы полимеразы;
• буферный раствор.

Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 – 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий. Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 – 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 – 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись. Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 – 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.

Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 – 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 – 2 минут.

ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 – 15 мин.

Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию

Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой – позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

1. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. — М.: Мир, 2002. — 589 с., илл. ISBN 5-03-003328-9
2. Щелкунов С.Н. Генетическая инженерия — Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2004. — 496 с.; илл. ISBN 5-94087-098-8
3. Патрушев Л.И. Искусственные генетические системы — М.: Наука, 2005 — В 2 т. — ISBN 5-02-033278-X
4. http://ru.wikipedia.org/wiki

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

ПЦР: какие болезни помогает выявить и на чем основывается

Зачастую пациенты при обследовании у уролога, гинеколога, венеролога и врачей других специальностей получают направление на ПЦР.Что это такое, знают немногие. Разберемся, на чем основывается этот анализ, при каких заболеваниях назначается и как его сдать правильно, чтобы получить достоверный результат.

Что такое ПЦР метод

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — диагностический метод, который позволяет обнаружить в человеческом организмеДНКвозбудителей заболеваний,передающихся половым путем(ЗППП). Этаметодикатакже применяется для установления отцовства, выявления наследственных патологий. Ее используют для экспериментов при клонировании и для определения новых генов.

Анализ ПЦРосновывается на взятие различных жидкостей из организма в качестве биологического материала. Он позволяет увеличить количество ДНК на одном участке в 2 раза при помощи специальных ферментов. Благодаря этому удается получить больше информации для подтверждения присутствия патогенного микроорганизма в биоматериале. Это позволяет обнаружить даже скрытое заболевание.

У пациентов часто диагностируютИППП методом ПЦР.Зачастуюинфекции,передаваемыеполовым путем, протекают без выраженной симптоматики. Их возбудителей сложно выявить при помощи другихисследований, т.к. они обладают низкой чувствительностью к патогенам. А ПЦР способна определить ДНК микробов в единичном количестве. Это невозможно сделать, например, при микроскопии и бактериологическом посеве.

Показания к назначению ПЦР на ЗППП

ПЦР на ИПППназначается при возникновении симптоматики венерических заболеваний:

• зуд и жжение в гениталиях;
• проблемы с мочевыведением;
• подозрительные выделения;
• покраснение влагалища у женщин или полового члена умужчин;
• сыпь на гениталиях;
• разрастание эпителия в шейке матки;
• эрозии на половых слизистых;
• воспаления в мочеполовой системе;
• изменение цвета спермы при подозрении наИППП у мужчин;
• увеличение лимфоузлов в паху;
• сбои в менструальном цикле;
• выкидыши, патологии беременности, проблемы с зачатием;
• киста яичников;
• спайки в органах малого таза;
• боли внизу живота;
• простатит у представителей мужского пола.

Какие инфекции диагностируют методом ПЦР

Диагностика ИППП ПЦРпозволяет обнаружить:

• Хламидиоз и уреаплазмы. Первое заболевание провоцируют хламидии. Они ведут жизнедеятельность в уретре, кишечнике, шейке матки. Без должного лечения приводят к бесплодию. Второй возбудитель вызывает уреаплазмоз. Чаще всего эта болезнь протекает бессимптомно и становится причиной выкидышей.
• ВИЧ, сифилиси нейросифилис. Последнее заболевание по симптоматике схоже с менингитом.
• Герпес(простой ВПГ 1 и 2 тип).
• Токсоплазмоз и краснуху.
• Инфекционный мононуклеоз (ДНКвируса Эпштейн-Барр-ВЭБ).
• Микоплазмоз. Мужчины чаще всего являются только носителями инфекции.
• Трихомониаз. У представителей мужского пола чаще всего протекает бессимптомно или проявляется только жжение при походах в туалет «по-маленькому». У женщин зачастую бывает обнаружено сопутствующее заболевание — трихомонадный кольпит.
• Кандидоз (молочница).
• ВПЧ штаммы 16 и 18 (вирус папилломы человека). Есть в организме практически у каждого человека. Большинство штаммов не представляют угрозы, но есть и такие, которые могут привести к онкологии.
• Цитомегаловирус. Обычно не провоцирует выраженную клиническую картину. Протекает в форме обычного ОРВИ.
• Гонорея. Провоцирует желтовато-белые выделения с неприятным запахом.
• Гарднереллез (бактериальный вагиноз). Клиническая картина схожа с молочницей.
• Туберкулез, листериоз, хеликобактерную инфекцию.
• Боррелиоз, клещевой энцефалит.

Как стало понятно,ПЦР анализспособен обнаружить возбудителей не только венерических заболеваний. Поэтому для постановки точногодиагнозаэту методику используют специалисты разных областей: урологи, гематологи, фтизиатры, гинекологи, гастроэнтерологи, онкологи, инфекционисты, венерологи.

Преимущества и недостатки ПЦР диагностики

ПЦРанализ на ИПППобладает такими преимуществами:

ПЦР у женщин

В этой статье Вы узнаете, как берут ПЦР у женщин, как проводится подготовка к ПЦР женщине, и что такое ПЦР тестирование у женщин.

Вы узнаете, как берут кровь на ПЦР у женщин, и, на какие инфекции проверяют мазок.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) у женщин позволяет выявить заболевания, передаваемые половым путем.

С целью обследования методом ПЦР берется мазок из влагалища, шейки матки и цервикального канала у женщин.

Также при необходимости исследуют мазок со слизистой ротовой полости, анального отверстия, мочу, кровь.

На какие инфекции смотрят кровь ПЦР у женщин

В специальный аппарат помещают биоматериал, а именно мазки со слизистых оболочек.

Добавляется фермент, который помогает синтезировать копию генетического материала микроорганизма (ДНК или РНК) в несколько этапов.

Результат сравнивают с так называемыми эталонами – существующей информацией о ДНК или РНК известных бактерий и вирусных частиц.

Как берут мазки для ПЦР у женщин?

Мазок берет венеролог или врач-гинеколог, с помощью специального деревянного шпателя, из наружного отверстия уретры, шейки матки и влагалища.

Забор материала – процедура безболезненная и вполне безопасная, осуществляется с помощью стерильного одноразового материала.

О том как проходит ПЦРу женщин рассказываетврач гинекологГаряева Ирина Владимировна

Содержание данной статьи проверено и подтверждено на соответствие медицинскимстандартам врачем дерматовенерологом, урологом, к.м.н.

Ленкиным Сергеем Геннадьевичем

Подготовка к сдаче анализа на ПЦР женщине заключается

Подготовка к сдаче анализа на ПЦР женщине заключается в следующем:

• Для сдачи мазка желательно выбрать 5-6 день цикла, то есть сразу после месячных.
• Не рекомендуется осуществлять спринцевания влагалища в течение суток до сдачи мазка.
• Если предполагается исследование материала со слизистой оболочки ротовой полости, перед обследованием желательно не есть и не пить в течение нескольких часов.
• В идеале, сдача анализов на ПЦР производится утром натощак или в первой половине дня.
• Нежелательно мочиться в течение 2 часов до сдачи мазка при заборе уретрального мазка.
• Не рекомендуется проводить мочеиспускание в течение двух часов перед забором материала на ПЦР из влагалища.

• Нельзя принимать антибактериальные как минимум за неделю до забора анализа.
• Рекомендуется воздержаться от половых контактов за двое суток до обследования.
• Гигиенические процедуры необходимо провести вечером.

Метод ПЦР позволяет выявить следующие заболевания:

Но это далеко не полный перечень инфекций.

Врач венеролог назначает анализ крови на ПЦР женщине при подозрении на наличие таких заболеваний как:

• Вирус иммунодефицита человека
• Вирусный гепатит B, C, D, G
• Цитомегаловирусная инфекция
• Энтеровирусная инфекция
• Токсоплазмоз
• Инфекционный мононуклеоз
• Листериоз

Когда после заражения сдают анализ мазка и крови на ПЦР у женщин?

Если Вам нужен контроль после антибиотиков, обычный ПЦР у женщин не покажет точные результаты.

Контрольный после лечения анализ назначается в виде бактериологического исследования, ПЦР у женщин малоинформативен.

Это связано с тем, что ПЦР у женщин получается ложноположительный.

Маленькие частички убитого инфекционного агента дают такую положительную реакцию.

Количественный результат ПЦР у женщин: что это

Когда нужно выполнять ПЦР тестирование количественным методом?

Именно для контроля после курса антибиотикотерапии можно использовать количественную методику ПЦР.

В отличие от обычного ПЦР, это метод даст представление о количестве возбудителя.

Результаты обследования обычно готовы через 1-2 дня.

Срок подготовки результатов зависит от клиники, удаленности лаборатории и других факторов.

Мазок изо рта: на какие ЗППП выполняется ПЦР у женщин

Некоторые половые инфекции, могут передаваться во время орального полового акта.

Кроме того, существует ряд иных заболеваний, при которых может потребоваться мазок на ПЦР из зева.

В ротовой полости женщины могут быть обнаружены такие инфекции как:

• хламидии
• бледная трепонема
• микоплазмы
• диплококки, а именно гонококк
• уреаплазмы
• половой герпес
• вирус папилломы человека
• Грибы рода Candida

Мазок из ануса: на какие инфекции выполняется ПЦР у женщин

Некоторые инфекции передающиеся половым путем способны развиваться и после анального секса в микрофлоре прямой кишки.

При этом у женщины возникает воспаление прямой кишки – проктит.

Не редкостью является и активизация неспецифической микрофлоры прямой кишки.

Возможно развитие кандидоза.

В случае попадания папилломавируса человека, на стенках прямой кишки могут появиться папилломы или бородавки.

Наиболее распространёнными инфекциями, которые обнаруживаются при заборе материала из прямой кишки, являются:

Где сдать анализы ПЦР у женщин?

Женщина может сдать анализ на ПЦР в частном или государственном кожно-венерологическом диспансере.

В частном КВД, вы можете сдать анализ анонимно и гораздо быстрее, по сравнению с государственным.

Сколько по времени делают анализы мазков и крови на ПЦР у женщин?

После сдачи материала, Вы получите расшифровку анализа на ПЦР через 1-2 суток, но в некоторых ситуациях, возможно получить результаты и в первый день.

Ложноотрицательный и ложноположительный ПЦР у женщин

Существует небольшая вероятность того, что результат анализа ПЦР будет ложным.

На результат могут и внешние факторы, связанные с технической оснащенностью лаборатории.

Поэтому наша клиника оснащена наиболее современным оборудованием.

Это позволяет минимизировать появление ложноположительного или ложноотрицательного результата.

ПЦР у женщин: цена

В зависимости от выбранной Вами клиники, цена может отличаться.

Цена зависит и от выбранной диагностируемой инфекции.

В нашей клинике цена анализа ПЦР на ИППП составляет 300 рублей.

Какой врач назначает анализ ПЦР у женщин

Врач, какой специальности может назначить анализ ПЦР у женщин?

Чаще всего анализы на инфекции назначает гинеколог или уролог.

Анализ крови на ВИЧ, методом ПЦР у женщин назначает врач инфекционист или венеролог.

Метод полимеразной цепной реакции отличается

Метод полимеразной цепной реакции отличается высокой чувствительностью и специфичностью.

Достаточно совсем немного исследуемого материала и, соответственно, ДНК или РНК бактерий и вирусов, чтобы выявить наличие или отсутствие тех или иных возбудителей.

Более того, с помощью метода ПЦР можно определить тип конкретного возбудителя.

Как подготовиться к мазку ПЦР у женщин

Давайте разберем, как подготовиться к мазку ПЦР у женщин.

Существует перечень правил, которые следует соблюдать перед анализом ПЦР.

Интерпретация результатов ПЦР у женщин

Интерпретация результатов ПЦР у женщин проводится врачом специалистом.

Результат может быть:

• положительным(выявлены те или иные возбудители заболеваний)
• отрицательным(возбудители заболеваний не выявлены в исследуемом материале)

Результаты анализов непременно должен оценить наблюдающий врач, и при необходимости назначить лечение.

При необходимости сдать ПЦР анализы обращайтесь к автору этой статьи – венерологу, урологу в Москве с 15 летним опытом работы.

ПЦР: какие болезни помогает выявить и на чем основывается

Зачастую пациенты при обследовании у уролога, гинеколога, венеролога и врачей других специальностей получают направление на ПЦР.Что это такое, знают немногие. Разберемся, на чем основывается этот анализ, при каких заболеваниях назначается и как его сдать правильно, чтобы получить достоверный результат.

Что такое ПЦР метод

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — диагностический метод, который позволяет обнаружить в человеческом организмеДНКвозбудителей заболеваний,передающихся половым путем(ЗППП). Этаметодикатакже применяется для установления отцовства, выявления наследственных патологий. Ее используют для экспериментов при клонировании и для определения новых генов.

Анализ ПЦРосновывается на взятие различных жидкостей из организма в качестве биологического материала. Он позволяет увеличить количество ДНК на одном участке в 2 раза при помощи специальных ферментов. Благодаря этому удается получить больше информации для подтверждения присутствия патогенного микроорганизма в биоматериале. Это позволяет обнаружить даже скрытое заболевание.

У пациентов часто диагностируютИППП методом ПЦР.Зачастуюинфекции,передаваемыеполовым путем, протекают без выраженной симптоматики. Их возбудителей сложно выявить при помощи другихисследований, т.к. они обладают низкой чувствительностью к патогенам. А ПЦР способна определить ДНК микробов в единичном количестве. Это невозможно сделать, например, при микроскопии и бактериологическом посеве.

Показания к назначению ПЦР на ЗППП

ПЦР на ИПППназначается при возникновении симптоматики венерических заболеваний:

• зуд и жжение в гениталиях;
• проблемы с мочевыведением;
• подозрительные выделения;
• покраснение влагалища у женщин или полового члена умужчин;
• сыпь на гениталиях;
• разрастание эпителия в шейке матки;
• эрозии на половых слизистых;
• воспаления в мочеполовой системе;
• изменение цвета спермы при подозрении наИППП у мужчин;
• увеличение лимфоузлов в паху;
• сбои в менструальном цикле;
• выкидыши, патологии беременности, проблемы с зачатием;
• киста яичников;
• спайки в органах малого таза;
• боли внизу живота;
• простатит у представителей мужского пола.

Какие инфекции диагностируют методом ПЦР

Диагностика ИППП ПЦРпозволяет обнаружить:

• Хламидиоз и уреаплазмы. Первое заболевание провоцируют хламидии. Они ведут жизнедеятельность в уретре, кишечнике, шейке матки. Без должного лечения приводят к бесплодию. Второй возбудитель вызывает уреаплазмоз. Чаще всего эта болезнь протекает бессимптомно и становится причиной выкидышей.
• ВИЧ, сифилиси нейросифилис. Последнее заболевание по симптоматике схоже с менингитом.
• Герпес(простой ВПГ 1 и 2 тип).
• Токсоплазмоз и краснуху.
• Инфекционный мононуклеоз (ДНКвируса Эпштейн-Барр-ВЭБ).
• Микоплазмоз. Мужчины чаще всего являются только носителями инфекции.
• Трихомониаз. У представителей мужского пола чаще всего протекает бессимптомно или проявляется только жжение при походах в туалет «по-маленькому». У женщин зачастую бывает обнаружено сопутствующее заболевание — трихомонадный кольпит.
• Кандидоз (молочница).
• ВПЧ штаммы 16 и 18 (вирус папилломы человека). Есть в организме практически у каждого человека. Большинство штаммов не представляют угрозы, но есть и такие, которые могут привести к онкологии.
• Цитомегаловирус. Обычно не провоцирует выраженную клиническую картину. Протекает в форме обычного ОРВИ.
• Гонорея. Провоцирует желтовато-белые выделения с неприятным запахом.
• Гарднереллез (бактериальный вагиноз). Клиническая картина схожа с молочницей.
• Туберкулез, листериоз, хеликобактерную инфекцию.
• Боррелиоз, клещевой энцефалит.

Как стало понятно,ПЦР анализспособен обнаружить возбудителей не только венерических заболеваний. Поэтому для постановки точногодиагнозаэту методику используют специалисты разных областей: урологи, гематологи, фтизиатры, гинекологи, гастроэнтерологи, онкологи, инфекционисты, венерологи.

Преимущества и недостатки ПЦР диагностики

ПЦРанализ на ИПППобладает такими преимуществами: